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當前位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 喹諾酮類檢測試劑盒的試驗步驟介紹

喹諾酮類檢測試劑盒的試驗步驟介紹點擊次數(shù):560 更新時間:2022-09-18

   喹諾酮類檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物喹諾酮類藥物和微孔條上預包被的偶聯(lián)抗原競爭抗喹諾酮類藥物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留喹諾酮類藥物的含量成負相關(guān),與標準曲線比較即可得出相應殘留物喹諾酮類藥物的含量。
 
  將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上,洗滌液冷藏時可能會有結(jié)晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。實驗開始前需:將20×濃縮洗滌液用去離子水按1:19稀釋成工作洗滌液。
 
  1、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
 
  2、加樣反應:加標準品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應45分鐘。
 
  3、洗滌:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
 
  4、顯色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘。
 
  5、終止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應。
 
  6、測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應終止反應后在10分鐘內(nèi)完成。
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